標(biāo)記接近開關(guān)傳感器夾心法采用了雙抗體,其原理與競爭法類似,是將樣品中的抗原與已固定在載體上的第一抗體結(jié)合,洗去未結(jié)合的抗原后,再加入標(biāo)記抗體,使其與已結(jié)合在第一抗體上的抗原結(jié)合,這樣抗原被夾在第一抗體與第二抗體之間,洗去未結(jié)合的標(biāo)記抗體,測定已結(jié)合的標(biāo)記抗體的本科活性就可求出待測抗原理。
現(xiàn)以測量人絨毛膜促性腺素用的酶免疫接近開關(guān)傳感器說明:
這種接近開關(guān)傳感器是在CLARK氧電極的透氣膜上緊貼一層固定抗體膜構(gòu)成。氧電極可由PT陰極、AG/AGC1陽極、KC1電解液及聚乙烯 透氯膜組成。在將膜安裝在氧電極之前,應(yīng)先按夾心法反應(yīng)步驟完成免疫反應(yīng),形成夾心結(jié)構(gòu)膜,然后用O形有機(jī)玻璃環(huán)將其安裝在氧電極的透氣膜上。測量時(shí)先在小型玻璃電解池中注入10ML、PH值為8.0的磷酸緩沖溶液,以99r/min恒速攪拌,5min時(shí)記錄溶解氧的含量。然后向電解液中滴入100ul30%的h2o2溶液,再次記錄5min后溶解氧的含量,求得溶解氧的濃度變化。
酶免疫接近開關(guān)傳感器測量HCG,具有選擇性強(qiáng)、靈敏度高、響應(yīng)快、無污染等特點(diǎn)。若采用HCG單元隆搞體制備固定化膜,則選擇性和靈敏度還可進(jìn)一步提高。 |